荷兰某猪场实验验证检测唾液中蓝耳病毒和蓝耳抗体所需绳索数浮球
2022-12-06 15:14:02
引言
综合诊断实验室对唾液中蓝耳病的PCR 检测和ELISA抗体检测进行优化和应用。考虑到场内的实际应用,有必要在猪群里做唾液抽样,来确认其相对敏感性和特异性的流行病学。这个验证实验为猪场在蓝耳病爆发后或者小面积流行时的ELISA 检测或者PCR检测所需最少绳索数提供了依据。
材料与方法
共收集了37个猪场的101份唾液样品和1088份血清样品(这些猪场是在了解其PRRSV发病史的基础上由兽医挑选的)。从采样到送至实验室不超过48小时,共挑选唾液样品42份(表1)。
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表1
血清样品用爱德士PRRSV X3试剂盒做ELISA检测抗体,实时PCR检测病毒,同时也设计了唾液优化实验草案。根据栏舍间流行(pp,有1头或者更多头PRRSV阳性小猪的栏舍数)和栏舍内流行(wpp,每个栏舍阳性小猪的数量),决定用同一猪只血清样品的ELISA 和PCR 结果和其唾液样品的检测结果做对比。并用Stata12和Winepiscope2统计分析唾液抽样的敏感性和特异性。
5个猪舍,每个猪舍有10个猪栏,每个猪栏有10 头小猪,共计500头8-10周龄的断奶后小猪,预计小面积流行或是大面积流行所需的绳索数量(小面积莱州流行:10%≤ wpp <50%,大面积流行:wpp ≥ 50%)。
结果
ELISA:10个猪场共22个栏舍中,有19个栏舍至少有1个阳性血清样品,pp为86%,其中有15个栏舍疫情大面积流行(wpp≥50%)。全部唾液样品中,有13份的ELISA 检测结果呈阳性。防爆柜唾液抽样法的敏感度是68%,(CI:95%:48-89%)。有4个栏舍的栏舍内流行率低、10%≤wpp<50%,在唾液中检测不到抗体。
PCR:14个猪场共42个栏舍中,有21个栏舍至少有1个阳性PCR 血清样品,pp为50%(CI:95%:34%-66%),唾液检测结果也为阳性的有15个栏舍,敏感度为71%(CI:95%:52-91%)。42个栏舍中,3个猪场的13 个栏舍疫情大面积流行(wpp≥50%),所有唾液检测结果都为阳性,唾液抽样的敏感度为100%。
当所有猪舍的wpp小于50%时,敏感度是25%,(CI:95%:0-50% )。
在疫情大面积流行的情况下,当wpp≥50%、pp介于80-90%时,检测蓝耳抗体和病毒需要2-3根绳索。
当栏舍内流行在小面积到大面积流行之间时,则需要4-7根绳索。
当wpp小于50%时,唾液抽样法不能检测抗体或者病毒。在小面积流行的栏舍中,即使有1个栏舍的血清样品检测为阳性,混合血清样品的检测结果也是阴性的高达75%。
结论与讨论
唾液抽样法是预警蓝耳疫情爆发的有效方法,仅需2-3根绳索为其诊断提供可靠的信息。当pp和wpp减少时,检测抗体和病毒需要的绳索数就会增加。
基于这次试验的数据,唾液抽样法不适合用于PRRSV小面积流行。然而这些数据缺乏统计学意义。矫直机本文只收集了4个栏舍的抗体数据和8个栏舍的病毒数据(0< wpp < 50%)。因此,还需要进一步地研究在小面积流行的情况下,唾液抽样法的有效性。
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